靈敏度評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據，也是產品注冊所需的重要申報材料之一。

靈敏(min)度的(de)(de)(de)定義可以理解(jie)為體外診斷試劑對待(dai)測(ce)(ce)樣(yang)本所能檢測(ce)(ce)到的(de)(de)(de)最(zui)(zui)小(xiao)量(liang)(liang)，有(you)兩個含義：①最(zui)(zui)小(xiao)濃(nong)度或含量(liang)(liang)的(de)(de)(de)變化可以引起檢測(ce)(ce)信號(hao)的(de)(de)(de)顯著變化；②具有(you)適當的(de)(de)(de)限(xian)度檢測(ce)(ce)出(chu)區別于零的(de)(de)(de)待(dai)測(ce)(ce)物的(de)(de)(de)最(zui)(zui)小(xiao)濃(nong)度或含量(liang)(liang)。

體(ti)外(wai)診(zhen)斷(duan)試劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)分(fen)析(xi)靈敏度也稱為檢(jian)(jian)測(ce)限，指檢(jian)(jian)測(ce)方法(fa)可檢(jian)(jian)測(ce)到的(de)(de)(de)最低檢(jian)(jian)測(ce)濃度，即(ji)(ji)在統計學意義上能(neng)與(yu)零(ling)劑(ji)(ji)量(liang)區別的(de)(de)(de)量(liang)。一般(ban)用95％可信(xin)限計算(suan)(suan)(suan)：重復測(ce)定空白樣本20次，計算(suan)(suan)(suan)20次反應(ying)測(ce)得的(de)(de)(de)均(jun)值(zhi)和標準差（SD），以(yi)平均(jun)值(zhi)+2SD（夾心法(fa)）或平均(jun)值(zhi)-2SD（競爭法(fa)）計算(suan)(suan)(suan)出(chu)相應(ying)的(de)(de)(de)濃度，即(ji)(ji)為體(ti)外(wai)診(zhen)斷(duan)試劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)分(fen)析(xi)靈敏度，也是(shi)注冊資料所需提供(gong)的(de)(de)(de)內容(rong)。

1.分析靈敏度評估需要的材料和基本要求：

 空(kong)白(bai)樣(yang)(yang)本的(de)制備：空(kong)白(bai)樣(yang)(yang)本應(ying)不含被(bei)測物，但(dan)其基質(zhi)應(ying)與帶測定常規樣(yang)(yang)本相同。如空(kong)白(bai)樣(yang)(yang)本難(nan)以獲得，可(ke)采(cai)用5%牛血清或人血清白(bai)蛋白(bai)溶(rong)液，或根據具體項目選擇相應(ying)基質(zhi)的(de)樣(yang)(yang)本，但(dan)是(shi)需要注意的(de)是(shi)，要將(jiang)基質(zhi)效應(ying)減到最小。

2.實驗方法：  

 在一次運(yun)行(xing)中重復(fu)測(ce)定空白樣本(ben)20次。

3.數據處理：

1）數據記錄(lu)：將結果(guo)記錄(lu)于表(biao)格(ge)。如(ru)果(guo)檢測系統對于低(di)于零的報告為(wei)零，應記錄(lu)初始響應值。

2）數據(ju)統計(ji)：計(ji)算20次平均值(zhi)和標準差SD

3）標準差計算公式：

4）結果報告：

  分析靈(ling)敏度 = 平均值+2SD（夾心法）或(huo)平均值-2SD（競爭(zheng)法） 

 體外診斷試(shi)劑(ji)的(de)功(gong)能(neng)靈(ling)敏(min)度與精密度相關，是(shi)以天間(jian)變異系(xi)數（CV）為20%時所對應的(de)檢(jian)測限(xian)樣本具有的(de)平均濃度。  

 1.計算方法：

 1）將低值樣本倍比稀釋后重復測定10次以上，計算每個低值樣本檢測信號的均值、標準差和變異系數（CV），選擇CV大于 20％時所對應的低值樣本平均濃度，這就是體外診斷試劑的功能靈敏度。 

 2）計算均值：                                          

 3）計算標準差：                                          

 4）計算變異系數：

4.提高靈敏度的方法：                          ;               

 1）抗原和抗體的親和性：兩者的親和性越高，靈敏度越高。  

 2）抗體的標記方法：標記信號物的放大效應可以提高靈敏度，如化學發光、膠體金、膠乳標記等。  

 3）抗原(yuan)抗體反(fan)應時間：反(fan)應時間的適當延長，可以使抗原(yuan)抗體的結合反(fan)應達到反(fan)應平衡，進而靈敏度也(ye)提高(gao)了(le)。如在化學發光免(mian)疫診(zhen)斷試劑中，抗原(yuan)與(yu)抗體在液相(xiang)中充(chong)分混合至(zhi)少(shao)反(fan)應10分鐘以上，有時還需要震蕩(dang)反(fan)應以提高(gao)反(fan)應速(su)率，這(zhe)樣比較容(rong)易獲得較高(gao)靈敏度。

 4）包(bao)被(bei)抗體(ti)(ti)(ti)與(yu)標記(ji)(ji)物的量：在達到反應平(ping)衡的條件下，可(ke)以適當增加(jia)包(bao)被(bei)抗體(ti)(ti)(ti)和標記(ji)(ji)物的濃度(du)(du)(du)，來提高(gao)靈(ling)(ling)敏(min)度(du)(du)(du)。如NC膜上的包(bao)被(bei)抗體(ti)(ti)(ti)、膠(jiao)體(ti)(ti)(ti)金標記(ji)(ji)抗體(ti)(ti)(ti)，微(wei)球標記(ji)(ji)的抗體(ti)(ti)(ti)等。但NC膜的抗體(ti)(ti)(ti)吸附量有限，可(ke)以通過優化標記(ji)(ji)來提高(gao)靈(ling)(ling)敏(min)度(du)(du)(du)。微(wei)球是以公家偶聯的方式與(yu)抗體(ti)(ti)(ti)結合，其靈(ling)(ling)敏(min)度(du)(du)(du)較高(gao)于(yu)膠(jiao)體(ti)(ti)(ti)金。

5）選擇靈敏度更高的表標記材料：膠體金是常用的標記物，但由于其具有較低的發光強度及較少的抗體吸附量，限制了膠體金免疫層析方法的靈敏度。而與抗體共價結合的材料，如鑭系元素，量子點，吖啶酯，膠乳微球等，有利于提高體外診斷試劑靈敏度。

6）發展信(xin)號放大系(xi)統(tong)：免疫(yi)層(ceng)析技(ji)術靈敏(min)度(du)不高的原(yuan)因主要(yao)是(shi)T、C線位置標記物信(xin)號不強，可以根據這一不足，優(you)化放大系(xi)統(tong)的反應條(tiao)件(jian)。有研究表明，通(tong)過添加銀增敏(min)劑(ji)到膠體金(jin)免疫(yi)層(ceng)析試(shi)劑(ji)條(tiao)NC膜的方法可以提高檢測靈敏(min)度(du)10-100倍。另外，改變膠體金(jin)顆粒的大小，也可以提高靈敏(min)度(du)

7）濃縮樣本：通過濃縮的方法增加樣品的濃度，以提高體外診斷試劑的靈敏度10倍左右。

8）選(xuan)擇優質的試紙(zhi)條：如在膠體金免疫層(ceng)析檢測方法中，不同(tong)的NC膜具有不同(tong)的孔徑、疏水性(xing)、親水性(xing)及(ji)其他性(xing)能的不同(tong)，會(hui)導致(zhi)靈敏度的差(cha)異。

9）緩沖(chong)液(ye)體(ti)(ti)系：合(he)適的(de)緩沖(chong)液(ye)體(ti)(ti)系可以穩定抗原抗體(ti)(ti)的(de)結合(he)能(neng)力及抗干擾能(neng)力，因此，合(he)適的(de)緩沖(chong)液(ye)體(ti)(ti)系也可以體(ti)(ti)外診斷試(shi)劑(ji)的(de)靈敏度。